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MDCK [NBL-2](犬腎上皮細胞)滲透模型:在藥物轉(zhuǎn)運研究中的核心應(yīng)用

更新時間:2025-08-15  |  點擊率:710

MDCK [NBL-2](犬腎上皮細胞)
別稱:Madin-Darby Canine Kidney (NBL-2) Cells;NBL-2;MDCK (NBL-2)

種屬與組織來源

  • 物種:家犬(Canis lupus familiaris

  • 組織來源:成年雌性英國小獵犬腎臟(1958年分離自外觀正常的個體)

  • 細胞類型:自發(fā)永生化上皮細胞

細胞特性與生物學(xué)特征

  1. 生長特性:貼壁依賴性生長,典型上皮細胞樣形態(tài)(多角形,緊密連接成單層)

  2. 功能特征: 

    • 角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性,明確上皮來源;

    • 廣泛用于病毒學(xué)研究(如流感病毒、冠狀病毒培養(yǎng))、藥物跨膜轉(zhuǎn)運模型及極性細胞功能分析;

    • 在β-淀粉樣蛋白前體加工及蛋白水解產(chǎn)物研究中具有重要應(yīng)用價值。

  3. 生物安全等級:BSL-1(基礎(chǔ)安全級別,適用于常規(guī)實驗室操作)

質(zhì)量控制與鑒定

  • 純度驗證:上皮細胞標(biāo)志物(如E-cadherin、角蛋白)陽性表達;

  • 無菌檢測:無細菌、真菌、支原體、HIV-1、HBV、HCV污染;

  • 穩(wěn)定性:傳代后保持典型形態(tài)與功能特性,可穩(wěn)定擴增。

培養(yǎng)指南

  • 推薦培養(yǎng)基:MEM(ATCC改良配方,貨號PM150467)+10% FBS(貨號164210)+1%青霉素-鏈霉素(P/S,貨號PB180120)

  • 培養(yǎng)條件:37℃,5% CO?,飽和濕度;氣相環(huán)境為95%空氣+5% CO?

  • 換液頻率:每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基

  • 傳代操作:推薦1:2至1:4比例傳代,使用0.25%胰蛋白酶(含EDTA)消化

  • 凍存條件:凍存液配方為55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO,液氮長期保存

應(yīng)用與研究價值
MDCK [NBL-2]細胞是病毒學(xué)、藥理學(xué)及細胞生物學(xué)研究的經(jīng)典模型,尤其適用于:

  • 病毒復(fù)制機制研究(如流感病毒宿主適應(yīng)性、抗病毒-藥物篩選);

  • 藥物跨膜轉(zhuǎn)運模型(極性上皮細胞屏障功能分析);

  • 阿爾茨海默病相關(guān)β-淀粉樣蛋白代謝研究。

保藏與來源信息

  • 保藏機構(gòu):ATCC(CCL-34, CRL-6253)、ECACC(84121903, 85011435)

  • 分離歷史:由S. H. Madin與N. B. Darby于1958年首-次建立,為最早的自發(fā)永生化犬腎細胞系之一。


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